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巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒檢測(cè)ABA的含量

點(diǎn)擊次數(shù):2071 更新時(shí)間:2018-01-03

 巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中,在今天的文章中,將為大家介紹如何用ELISA方法去檢測(cè)ABA的含量!
    先將ABA蛋白質(zhì)復(fù)合物與固相載體(聚苯乙烯微量滴定板)結(jié)合,然后將待測(cè)的ABA(樣品或標(biāo)準(zhǔn)品)和兔抗ABA抗體加入微量滴定板的孔中,進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng),接著棄去上清液,洗滌固相表面,加入酶標(biāo)二抗使其與結(jié)合在固相ABA上的抗體反應(yīng),zui后去除多余的未反應(yīng)的酶標(biāo)二抗,測(cè)定與固相結(jié)合的酶活性,酶活性和待測(cè)ABA含量呈負(fù)函數(shù)關(guān)系,即固相ABA結(jié)合的抗體與酶標(biāo)二抗量(OD或B%)隨待測(cè)ABA含量增加而減少,以一系列已知濃度的ABA的OD值制圖而獲得標(biāo)準(zhǔn)競(jìng)爭(zhēng)性抑制曲線,對(duì)于未知樣品B,只要在同樣條件下測(cè)定反應(yīng)后的OD值,就可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到ABA的量。
測(cè)定方法 
1.包被:在微量滴定板內(nèi)準(zhǔn)確加入100μLABA包被液,37℃濕盒過(guò)夜。 
2.標(biāo)樣稀釋?:取8支試管每管加150μLDB,*管中加入50μL(2000ng/50μL)標(biāo)準(zhǔn)液,充分渦旋后,取50μL至第二號(hào)管中,同樣渦旋后,取50μL到第三管;依次稀釋到第六管,稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)ABA依次為1000ng、500ng、250ng、125ng、62.5ng、31.25ng、15.625ng、7.8125ng/50μL。 
3. 洗板:從37℃濕盒中取出滴定板,恢復(fù)到室溫后,棄去包被液,用WB(洗滌緩沖液)洗滌三次,甩干(吸水紙)。 
4.加樣:1~8孔對(duì)應(yīng)加入ABA標(biāo)樣50μL,10號(hào)孔相應(yīng)加入zui濃ABA標(biāo)樣,9號(hào)孔加50μLDB,三排重復(fù);然后每孔加50μL抗體,37℃ 45分鐘。 
5.洗板: 
6.加酶標(biāo)二抗:每孔加100μL,37℃反應(yīng)1小時(shí)。 
7.洗板: 
8.顯色:各孔加10μLOPD顯色液,37℃ 20分鐘。 
9.巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒終止反應(yīng):各孔加50μL 6NH2SO4。 
303-98-0     輔酶 Q10環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)品    25mg
30806-86-1     相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品    25mg
31055-19-3    相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品    25mg
3147-75-9    紫外線吸收劑UV-329標(biāo)準(zhǔn)品    25mg
315-69-5     曲米帕明標(biāo)準(zhǔn)品    25mg
321571-07-7    相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品    25mg
33288-71-0     美比達(dá)相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    25mg
4097-22-7    地丹諾辛相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品    25mg
42017-89-0     相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品    25mg
42019-78-3     相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    25mg
巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒

 

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